Nijolė Ambrazaitytė urodziła się 21 lutego 1939 roku w wiosce Burokai w rejonie Lazdijai. 22 maja 1948 roku, jeszcze przed końcem roku szkolnego, została zesłana wraz ze swoimi dziadkami, siostrą matki i ich rodziną do obwodu Krasnojarska. Pierwszym miejscem zsyłki była Igrarka, gdzie przebywali aż do 1956 roku. Następnie przenieśli się do Maklakowa, gdzie mieszkała od 1956 do 1957 roku. Po powrocie do Litwy ukończyła szkołę średnią w Raseiniach. W latach 1959-1966 uczyła się solowego śpiewu w Litewskiej Państwowej Konserwatorium (obecnie Akademia Muzyki i Teatru w Litwie) u docentki Eleny Mažrimaitė-Dirsienė. W latach 1966-1999 była solistką opery i baletu w Litewskiej Operze i Baletu. W latach 1990-1992 była deputowaną do Najwyższej Rady - Sejmu odrodzonej Litwy, a następnie w latach 1992-1996 i 1996-2000 posłanką Sejmu oraz przewodniczącą Komisji Kultury Stowarzyszenia Wysiedlonych Wileńczyków. Już podczas studiów solowego śpiewu w 1964 roku stworzyła swój pierwszy występ na scenie Opery i Baletu (Lola, P. Mascagni "Wieśniacza czułość"). Jej pracą dyplomową była rola Eboli w operze "Don Carlos", jedna z najtrudniejszych ról mezzosopranowych w repertuarze. Kreowała około 30 ról operowych i wykonała ponad 400 koncertów solowych. Brała udział w ponad 3 000 koncertach w różnych programach w Litwie i zagranicą. Nagrywała i wydała 8 płyt z około 24 godzinami różnej muzyki. Wykonywała utwory takich kompozytorów jak W.A. Mozart, J.S. Bach, G.F. Handel, F. Schubert, J. Brahms, A.L. Dvořák i H. Berlioz. W operach kreowała Karmen, Amneris, Charlotte, Adalgyza, Mirta, Eboli, Azucena, Maddalena, Fenena, Marianę Mniszek i Ortrudę. Była pierwszą, która wykonywała utwory litewskich kompozytorów V. Laurušas, E. Balsys, A. Bražinskas, K. Brundzaitė, F. Bajoras, V. Telsknis i innych. Nijolė wykonywała także solowe partie w dziełach J.S. Bacha, jak "Oratorium Bożonarodzeniowe" i "Msze h-moll", w utworach G.F. Handla "Judas Macabeusz", "Samson", w IX symfonii L. van Beethovena oraz "Missa Solemnis", w utworach G. Verdiego i A. Dvořáka, w "Requiem" W.A. Mozarta, w oratorium "Nie dotykaj niebieskiego cieni" E. Balsysa. Nijolė zakończyła wieloletnią pracę w Narodowej Operze i Baletu Litwy 20 lutego 1999 roku w 60. rocznicę swojego urodzin przedstawieniem "Aida" G. Verdiego. Było to jej ostatnie wystąpienie na scenie Opery i Baletu. Brała także udział w koncertach i przedstawieniach w Mongolii, USA, Kanadzie, Australii, Włoszech, Hiszpanii, Finlandii, Chile, Peru, Kubie, Bułgarii, Rumunii oraz odwiedziła wiele miast i miasteczek Rosji.